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凝膠成像系統(tǒng)的功能與應(yīng)用

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于凝膠成像系統(tǒng)的功能與應(yīng)用:
   
凝膠成像系統(tǒng)的功能與應(yīng)用范圍:凝膠成像系統(tǒng)是實(shí)驗(yàn)室常用的一種儀器,其應(yīng)用范圍廣泛??偟膩碚f,凝膠成像系統(tǒng)可以用于:蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析;確定生物分子的分子量;用于生物分子的定量分析。
不同種類凝膠成像系統(tǒng)的應(yīng)用范圍有哪些區(qū)別?
按照凝膠成像系統(tǒng)的類別分類的各自應(yīng)用范圍如下:
(1)普通凝膠成像分析系統(tǒng):可以對蛋白電泳凝膠,DNA凝膠樣品進(jìn)行圖象采集并進(jìn)行定性和定量分析,樣品包括:EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監(jiān)測;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質(zhì)凝膠如考染等。成像范圍涵蓋UV,EB和有色及可見樣品成像;
(2)化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學(xué)發(fā)光、紫外-熒光、有色及可見樣品成像;
(3)多色熒光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像;
(4)多功能活體成像分析系統(tǒng):UV,EB,化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像和離體組織和小型動物,及大型動物。
凝膠成像系統(tǒng)具體可以用于哪些實(shí)驗(yàn)分析?
具體從使用分析的角度來看,凝膠成像系統(tǒng)可以應(yīng)用于分子量計(jì)算,密度掃描,密度定量,PCR定量等生物工程常規(guī)研究。
(1)分子量定量 
對于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。 
(2)密度定量 
一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶,根據(jù)與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對PAGE蛋白膠條帶的濃度測定。
(3)密度掃描 
在分子生物學(xué)和生物工程研究中,**常用到的是對蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。傳統(tǒng)的方法是利用專用的密度掃描,但利用生物分析軟件,結(jié)合白光照射的凝膠成像獲取圖片,就能完成此項(xiàng)工作。 
(4)PCR定量 
PCR定量主要是指,如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來的條帶不是一條,那么可以利用軟件計(jì)算出各個條帶占總體條帶的相對百分?jǐn)?shù)。就此功能而言,與密度掃描類似,但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進(jìn)行相對密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù),密度掃描時對選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。
 
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