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電泳分析常用方法
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于電泳分析常用方法:
電泳分析常用方法
(一)醋酸纖維素薄膜電泳
醋酸纖維素是提纖維素的羥基乙?;纬傻睦w維素醋酸酯。由該物質(zhì)制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄膜。這種薄膜對(duì)蛋白質(zhì)樣品吸附性小,幾乎能完全消除紙電泳中出現(xiàn)的“拖尾”現(xiàn)象,又因?yàn)槟さ挠H水性比較小,它所容納的緩沖液也少,電泳時(shí)電流的大部分由樣品傳導(dǎo),所以分離速度快,電泳時(shí)間短,樣品用量少,5μg 的蛋白質(zhì)可得到滿意的分離效果。因此特別適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測(cè)。
醋酸纖維素膜經(jīng)過(guò)冰醋酸乙醇溶液或其它透明液處理后可使膜透明化有利于對(duì)電泳圖譜的光吸收掃描測(cè)定和膜的長(zhǎng)期保存。
⒈材料與試劑 醋酸纖維素膜一般使用市售商品,常用的電泳緩沖液為pH8.6 的巴比妥緩沖液,濃度在0.05-0.09mol/L。
⒉操作要點(diǎn)
⑴膜的預(yù)處理:必須于電泳前將膜片浸泡于緩沖液,浸透后,取出膜片并用濾紙吸去多余的緩沖液,不可吸得過(guò)干。
⑵加樣:樣品用量依樣品濃度、本身性質(zhì)、染色方法及檢測(cè)方法等因素決定。對(duì)血清蛋白質(zhì)的常規(guī)電泳分析,每 cm加樣線不超過(guò)1μl,相當(dāng)于60-80μg的蛋白質(zhì)。
⑶電泳:可在室溫下進(jìn)行。電壓為25V/cm,電流為0
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于電泳分析常用方法。
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